不难理解，如果血清中存在病毒，不仅细胞不能得到很好的维护，实验人员的安全也会受到威胁。

那么血清中内毒素的水平会对细胞培养产生什么影响呢？ 为什么要选择内毒素含量低的血清？

那么今天我们就来说说细胞培养中血清中的内毒素问题。

什么是内毒素？

内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁的一种成分，称为脂多糖。 脂多糖对宿主有毒。 内毒素只有在细菌死亡、溶解或被人为破坏时才会释放，故称为内毒素。

人体对细菌内毒素极为敏感。

极少量（1-5ng/kg，1ng≈2.5EU）内毒素即可引起体温升高，发热反应持续约4小时，然后逐渐消退。

自然感染时，由于革兰氏阴性菌不断生长繁殖，不断死亡，并释放出内毒素，发热反应会持续到体内病原菌被完全消灭为止。

内毒素之所以引起发热反应，是因为内毒素作用于体内的巨噬细胞、中性粒细胞等，使它们产生IL-1、IL-6、TNF-α等细胞因子。 这些细胞因子作用于宿主下丘脑。 人体的温度调节中枢促使体温升高而发烧。

由于内毒素是由细菌死亡、裂解或自溶引起的，因此内毒素在环境中大量存在。 但如果细胞培养过程中出现大量内毒素，那就不是什么好事了。

内毒素对细胞有什么影响？

先前的实验已进行过观察内毒素对细胞培养物的影响，记录的影响包括刺激白细胞培养物中的组织因子产生、激活小鼠巨噬细胞，以及通过极低水平（低于 1 ng/mL）的内毒素抑制一系列小鼠红细胞集落形成等指标。

随后，发表了许多关于内毒素对细胞功能和体外生长的影响的论文。

细胞类型

浓度（纳克/毫升）

内毒素效应

马巨噬细胞

0.5

诱导 IL-6 的产生

人类体外受精胚胎细胞

体外受精成功率降低3-4倍

主动脉内皮细胞

10

硫酸肝素蛋白聚糖的剂量依赖性变化

鼠B淋巴瘤

10

免疫球蛋白轻链产量增加30-40倍

重组CHO细胞

10

改变蛋白质生产

心肌细胞

10

诱发收缩功能障碍

人类T细胞

100

在单核细胞存在的情况下诱导增殖和淋巴因子产生

尿路上皮细胞

5000

改变克隆效率

发现 (1) 低至 0.5 ng/mL 的内毒素水平仅在暴露 6 小时后即可显着增加马腹膜巨噬细胞中 IL-6 的产生。 发现（2）100 ng/mL的内毒素可以刺激人类T细胞的增殖及其淋巴因子的产生，但这种刺激需要与先前暴露于内毒素的单核细胞直接物理接触。 据报道，10 至 200 ng/mL 内毒素刺激鼠 B 细胞肿瘤细胞系 (70Z/3) 完成 IgM 的产生，然后在细胞表面表达 (3)。

基于上述证据，很明显内毒素对每种细胞类型的影响不同。 接下来我们将研究产生这些效应的机制。

内毒素对细胞有什么影响？

关于内毒素与细胞培养物相互作用的机制仍有很多未知之处 (4,5,6,7)。

有一些研究报告：

参考：

1.，DD，Crowe，N.，Moore内毒素，JNand，LL – 6，体外。 是。 J.兽医。 决议 53：1298-1301 (1992)。

2.、T.、A.、、N.、K.、、M.、、S.、ET、Ernst, M.、Brade, H.、Flad、HD 和 Ulmer, AJ 和 Lipid A人类 T 细胞的数量。 J.. 153:2996-3004(1994)。

3.，CH，Terry，A. 和 Raetz，Lipid AJ Biol 的 70Z/3 细胞中 K 轻链的 CRH。 化学。 263：5098-5103（1988）。

4. DC、CA、RS、C.、R.、M.、JJ、RJ、Vogel、SN 和 E.。 ASM 新闻，60：479-484 (1994)。

5.Raetz，CRH。 安努。 启示录 59：129-170（1990）。

6.Raetz，CRH：那个。 J.Bact.175:5745-5753 (1993)。

7.Raetz, CR, RJ, SD, CH, Ding, A. 和 CF Gram-：一种脂质。 FASEB J.5：2652-2660 (1991)。

8. Risco, C.,, JE, Bosch, MA, 和, JL 和

的体外。 摩尔。 细胞。 。 121：67-74（1993）。

从现有的研究可以看出，内毒素对细胞培养的影响很大：

改变细胞形状

激活细胞产生信息物质

抑制酶活性

抑制人工授精的成功率等。

如果内毒素太高，甚至可能会直接改变我们的实验结果。 因此，尽量避免内毒素的干扰。

一般来说，细胞或组织培养过程中内毒素污染的来源通常来自血清、培养基和制备附加药物的水。

因此，选择内毒素含量低的血清显得尤为重要。

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