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血清蛋白电泳的方法学原理及检验方法

将 1 个(7 个或 15 个)或 2 个(30 个)样品梳放在板上,编号端朝上,并在 2 分钟内完成每个样品梳的添加。 加入10ul样品,然后将梳子放入加湿盒中,齿梳朝上5分钟。 选择相应的电泳程序。 使用7(E)时,选择仪器的“7”电泳程序。 使用15/30(E)时,选择仪器的“15/30”程序。 从包装袋中取出缓冲条,将其固定在电极架背面的钉子上。 然后取出凝胶,用薄滤纸快速轻轻吸去凝胶表面多余的液体,置于温控板表面下方1/3处。 添加 120 µl [7 (E)] 或 200ul [15 (E)] 蒸馏水或去离子水,将凝胶片的底部边缘靠近框架的底部边缘,将边缘与边缘对齐,弯曲凝胶片轻轻地、慢慢地把它放平。 ,注意凝胶片下面不要出现气泡。 (5)自然放下支架,从湿箱中取出采样梳,取下齿梳下方的保护支架。 用于7和15个样品分析的采样梳放置在支架的位置6,用于30个样品分析的采样梳单独放置。 在位置 3 和 9 处,请注意定位梳上的数字必须面向操作员。 关闭电泳舱,按键盘左侧绿色箭头“START”键开始电泳。 确保仪器右侧的空气通道未被堵塞。 被堵塞。

电泳仪自动发出蜂鸣声,提示电泳结束。 打开电泳盖,丢弃样品梳和缓冲条血清蛋白电泳,取出干燥的胶片,用湿纸巾擦拭电极和温控板,并将胶片固定在凝胶架上。 将其放入染色空间。 检查染液瓶内是否有300ml染色液、脱色液瓶内是否有脱色液、废液瓶是否已空后,选择“PROT./B1-B2/Hb”染色程序,按“开始”按钮开始染色。 染色、脱色、干燥步骤完成后,电泳仪自动发出蜂鸣声,取出凝胶架,用光密度计扫描干燥的胶片。 如果您希望胶片背景更清晰,可以在扫描前添加一个额外的凝胶支架。 洗涤步骤,程序为“WASH/GEL”。 关闭计算机并在计算机系统上分析扫描结果。 八。 参考范围:白蛋白 60.0~71.0% α1-球蛋白 1.4~2.9% α2-球蛋白 7.0~11.0% 2β-球蛋白 γ-球蛋白 0~13.0% 0~16.0% 9.临床意义 血清蛋白是血浆中最大的固体成分,有300多种类型。 每种蛋白质都承担一定的生理功能(如白蛋白、球蛋白、补体成分等)。 许多疾病都会引起多种蛋白质的变化,因此分析这些变化具有临床意义,可以用来跟踪病情和预测预后。 蛋白电泳图谱可以早期发现以下疾病: 总蛋白浓度 Alb α1 α2 β γ 双白蛋白血症 感染综合征 急性炎症 慢性炎症性肝病综合征 肝炎 肝硬化 肝癌 低白蛋白血症 肾病综合征 M 蛋白血症 蛋白缺陷型 10. 标本需要双峰 N ↓ N ↑ ↑ N ↓ ↑ ↑ ↑↓N ↓↓ ↑↓ ↓ ↓ ↑↓N↑ ↓↓ N ↓ N ↓ β-γ 桥↓N ↓↓甲胎蛋白 N ↓ N ↑N↓ ↓ ↓↓ N↑ N↑ ↓ N↑ ↓↓ ↓↓ ↑ ↑↑ ↓N↑← M 蛋白峰 ← 白蛋白或某些球蛋白 ↓↓ →→ 取新鲜血清进行分析,根据各种实验室测试进行分析 所用的操作程序用于收集血清或尿液样本。 样品在冰箱(2-8℃)中可保存1周。 如果冷冻的话,保存时间至少可以延长1个月。

在冷冻血清样品中添加 0.02g/dl 叠氮化钠可以提高其储存稳定性。 点样时使用未稀释的血清样本。 当样品储存在 2°C 至 8°C 或冷冻时,某些血清(其特征是含有冷球蛋白成分)可能会变得粘稠或混浊。 处理这些样本时可能很难发现。 在这种情况下,用稀释剂进行预处理,即在75ul血清中加入25ul液化剂,在摇床上混合15秒,然后按照规定程序继续。 避免使用溶血标本和血浆标本。 11. 操作注意事项 为达到最佳检测效果,同一试剂盒中的所有成分必须一起使用。 氨基黑染色液的配制必须按照试剂盒中的说明进行配制,否则会降低蛋白片段的检测效果。 (iii)用薄滤纸吸去凝胶表面多余液体时,接触时间不宜过长,并应迅速除去,以免凝胶脱水。 ∣ 注意先悬挂缓冲条,再放置凝胶片。 取出缓冲条时,均匀挤压,使缓冲条分布均匀。 3

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